高效液相色譜(HPLC)具有廣泛的應(yīng)用范圍,并且廣泛適用于樣品。它不受分析對(duì)象的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制。在目前已知的有機(jī)化合物中,約20%可通過氣相色譜分析,而80%需要通過高效液相色譜分析。高效液相色譜具有分離效率高、分析速度快、檢測(cè)靈敏度好的特點(diǎn),能夠分析和分離高沸點(diǎn)、不氣化的熱不穩(wěn)定生理活性物質(zhì)。
色譜法的分離原理是:當(dāng)溶解在流動(dòng)相中的組分通過固定相時(shí),由于與固定相的相互作用(吸附、分布、排斥和親和)的大小和強(qiáng)度不同,固定相中的保留時(shí)間也不同,因此它們依次從固定相流出。也稱為色譜法和色譜法。
現(xiàn)代HPLC儀器還具有用于自動(dòng)儀器控制和數(shù)據(jù)處理的微機(jī)控制系統(tǒng)。高效液相色譜儀用于檢測(cè)和分析高沸點(diǎn)有機(jī)化合物。這些化合物不易揮發(fā),加熱時(shí)不穩(wěn)定,分子量大。(HPLC)由于其高分辨率、高靈敏度、快速、可重復(fù)使用的色譜柱、易于收集流出物組分等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于環(huán)境分析、生物化學(xué)、無極分析等多領(lǐng)域。高效液相
色譜分析儀用于檢測(cè)和分析高沸點(diǎn)、高揮發(fā)性、加熱不穩(wěn)定和高分子量的有機(jī)化合物
。
HPLC的輸液泵需要恒定穩(wěn)定的輸液量;采樣系統(tǒng)要求采樣方便,切換嚴(yán)密;由于液體流動(dòng)相的粘度比氣體的粘度高得多,為了降低柱壓,高效液相色譜的色譜柱通常較厚,長(zhǎng)度比氣相色譜柱短得多。
高效液相色譜法適用于分離和分析高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、具有生理活性和相對(duì)較高分子量的物質(zhì)。因此,它廣泛用于核酸、肽、內(nèi)酯、多環(huán)芳烴、聚合物、藥物、人體代謝物、表面活性劑、抗氧化劑、農(nóng)藥、除草劑和其他物質(zhì)的分析。